二手液相色譜儀其他常用檢測器還有示差折光檢測器RID、蒸發(fā)光散射檢測器ELSD、熒光檢測器、電噴霧檢測器CAD。液相色譜其他常用檢測器原理及優(yōu)缺點有哪些?
示差折光檢測器RID
RID是一種通用檢測器,對所有樣品都有響應(yīng)。
原理
示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進入另一種介質(zhì)時,由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會產(chǎn)生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數(shù)不同,就可被檢測,二者相差愈大,靈敏度愈高,在一定濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。
優(yōu)缺點
優(yōu)點是通用,沒有不能檢測的。
缺點:靈敏度低,一般來說有關(guān)物質(zhì)檢測不能用它,RID一般用于含量測定;另一個缺點由它的原理決定,只能等度,所以多組分的分離存在問題。還有平衡時間過長,對環(huán)境要求高(尤其是室溫的波動)也是讓操作人員困擾的因素。
蒸發(fā)光散射檢測器ELSD
一種新型的通用檢測器,用于不易揮發(fā)的組分。靈敏度一般來說介于紫外檢測器和示差折光檢測器之間。
原理
用惰性氣體霧化洗脫液,在加熱管(漂移管)中將流動相蒸發(fā),樣品顆粒進入檢測器散射激光光源發(fā)出的光,光信號轉(zhuǎn)化為電信號被輸出。原理看起來很高大上,且靈敏度也還可以,面對如此多的沒有紫外響應(yīng)的化合物,理論上說應(yīng)該可以一統(tǒng)江湖了。事情總有但是,下個章節(jié)詳細評論ELSD的優(yōu)缺點。
優(yōu)缺點
優(yōu)點就是通用,不論有沒有紫外響應(yīng),它都有響應(yīng),只要揮發(fā)性弱于流動相即可。且可以走梯度,可以用于分離復(fù)雜的混合物。但是……缺點也很多。讓人無法接受的缺點是濃度與響應(yīng)者不呈線性,二者的對數(shù)呈線性關(guān)系。線性非常差,線性范圍不大,相關(guān)系數(shù)非常差,還有截距非常大。由于這個缺點,我想大家已經(jīng)明白該檢測器單點外標法不可行,所以該檢測器一般用于外標兩點法(供試品響應(yīng)值需在兩個對照品之間,不允許外延)檢測含量;有關(guān)物質(zhì)很少用該檢測器。大家應(yīng)該能夠理解,每個雜質(zhì)都要配制兩個不同濃度的對照品溶液,且供試品響應(yīng)值在兩個對照之間(做不到的,雜質(zhì)的量無法預(yù)測,不像含量),這是一間多么讓人崩潰的事情。
另一個缺點是流動相需要能揮發(fā),也就是意味著不能存在不易揮發(fā)的組分,也就是說的磷酸鹽系列不能用了。還有需要提高氣體,操作繁瑣,會產(chǎn)生有害氣體等。
熒光檢測器
熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學衍生化生成熒光衍生物,再進行熒光檢測。其檢測濃度可達0.ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高個數(shù)量級,但其線性范圍不如紫外檢測器寬。
近年來,采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器大大地增強了熒光檢測的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。
原理
化合物受紫外光激發(fā)后,發(fā)射出比激發(fā)光波長更長的光,稱為熒光;熒光強度 (F) 與激發(fā)光強度 (I0) 及熒光物質(zhì)濃度 (C) 之間的關(guān)系為:F=.3QKI0εCl;F=KC,Q為量子產(chǎn)率,K為熒光效率,ε為摩爾吸光系數(shù),l為光徑長度。從電子躍遷的角度來講,熒光是指某些物質(zhì)吸收了與它本身特征頻率相同的光線以后,原子中的某些電子從基態(tài)中的振動能級躍遷到較高的某些振動能級。電子在同類分子或其他分子中撞擊,消耗了相當?shù)哪芰?,從而下降到電子激發(fā)態(tài)中的振動能級,能量的這種轉(zhuǎn)移形式稱為*輻射躍遷。由振動能級下降到基態(tài)中的某些不同能級,同時發(fā)出比原來吸收的頻率低、波長長的一種光,就是熒光。被化合物吸收的光稱為激發(fā)光,產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光。熒光的波長總要長于分子吸收的紫外光波長,通常在可見光范圍內(nèi)。熒光的性質(zhì)與分子結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系,不同結(jié)構(gòu)的分子被激發(fā)后,并不是都能發(fā)射熒光。
優(yōu)缺點
熒光檢測器優(yōu)點是靈敏度非常高,可以達到ppt級別。缺點是適用范圍窄,僅適用于被激發(fā)后能產(chǎn)生熒光的物質(zhì),該缺點限制了熒光檢測器的應(yīng)用。
電噴霧檢測器CAD
一種新型的通用檢測器,賽默飛公司出品,目前處于保護期間。靈敏度優(yōu)于ELSD。
原理
步驟一:檢測器將分析物轉(zhuǎn)化成溶質(zhì)顆粒。顆粒的大小隨著被分析物的含量而增加。步驟二:溶質(zhì)顆粒與帶正電荷的氮氣顆粒相撞,電荷隨之轉(zhuǎn)移到顆粒上 – 溶質(zhì)顆粒越大,帶電越多。步驟三:溶質(zhì)顆粒把它們的電荷轉(zhuǎn)移給收集器,通過高靈敏度的靜電檢測計測出溶質(zhì)顆粒的帶電量,由此產(chǎn)生的信號電流與溶質(zhì)的含量成正比。
優(yōu)缺點
優(yōu)點同ELSD,但是靈敏度更高。賽默飛的宣傳中將其推崇的神乎其神,但是它也有但是。缺點也同ELSD,線性較差,但優(yōu)于ELSD。在全量程范圍內(nèi)都是非線性響應(yīng),但CAD的重現(xiàn)性更好且在小濃度范圍內(nèi)響應(yīng)基本呈線性。CAD雖然將原理改為使顆粒帶電檢測收集的電信號,使得濃度與響應(yīng)者在一定范圍內(nèi)直接呈線性關(guān)系。但是顆粒的形成過程是一個非物質(zhì)本身屬性決定的過程,也就意味著響應(yīng)是不穩(wěn)定的。不同于紫外檢測器,紫外吸收是物質(zhì)本身的屬性,不會更改,擁有良好的重現(xiàn)性。
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